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      技術(shù)文章

      人臍帶單核細胞提取物操作要點
      點擊次數(shù):756 更新時間:2023-03-02

      人臍帶單核細胞提取物操作要點:

      1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。

      2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

      3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

      4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

      5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

      6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

      alpha 2 Macroglobulinα2巨球蛋白抗體

      ACCSLACCSL蛋白抗體

      AFP甲胎蛋白抗體

      Mint3β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體

      ASTN2星形肌動蛋白抗體

      TREX1系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體

      phospho-ATRIP 磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體

      Phospho-ATRIP 磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體

      AP2M1接頭相關(guān)蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體

      Phospho-AP2M1 磷酸化接頭相關(guān)蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體

      Annexin A7膜粘連蛋白7抗體

      C3orf153號染色體開放閱讀框15抗體

      APOB48R載脂蛋白B受體抗體

      ABCA2三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白2抗體

      ApoB 載脂蛋白B抗體

      ALOX15B花生四烯酸15脂氧合酶2抗體

      APOC4載脂蛋白C4抗體

      ARH低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體

      AUP1原始廣泛存在蛋白1抗體

      ANKRD37錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體

      A4GALTα1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1

      AGTRAP血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體


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