小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞培養(yǎng)試劑盒說明書

小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞培養(yǎng)試劑盒【MouseSkeletalPrimacellTM：Normal Skeletal Satellite Cells】
  小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞培養(yǎng)試劑盒說明書肌衛(wèi)星細胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維（肌細胞）外的一種扁平、有突起的細胞。附著于肌纖維（肌細胞）表面；當(dāng)肌纖維（肌細胞）受損后，肌衛(wèi)星細胞可增殖分化，參與肌纖維（肌細胞）的修復(fù)，因此具有干細胞性質(zhì)。 雖然骨骼肌組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的骨骼肌組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的骨骼肌組織片能使得骨骼肌組織中成骨骼肌衛(wèi)星細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成骨骼肌衛(wèi)星細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成骨骼肌衛(wèi)星細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個衛(wèi)星細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的衛(wèi)星細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的成骨骼肌原代衛(wèi)星細胞中成纖維衛(wèi)星細胞的含量。 小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞衛(wèi)星細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成骨骼肌組織衛(wèi)星細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞組織洗液（5x00 ml） （5）小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x00ml） （7）小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞組織預(yù)備液（ x00 ml） （8）小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書

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注意事項：
. 接收到小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟：
小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

產(chǎn)氣腸桿菌 Enterobacter aerogenes根瘤菌 Rhizobium sp.

新生兒表皮角化細胞*培養(yǎng)基EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞)

產(chǎn)朊假絲酵母 Candida utilis植物桿菌 Lactobacillus plantarum

GH3(大鼠垂體瘤細胞)大鼠肺大動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

酒假絲酵母 Candida kefyr球擬圓酵母 Torulopsis globosa

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

MLTC-(小鼠睪間質(zhì)細胞瘤細胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformisNG08-5(小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞)

柱形孢鏈霉菌 Streptomyces cylindrosporus桿菌屬 Lactobacillus sp.

人大細胞肺細胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

小鼠肌骼肌衛(wèi)星細胞培養(yǎng)試劑盒說明書解毒喹英文名稱：Detoxification分子式：335.83分子量： C8H22ClNO3：99607-70-2

5,5-二硫-,-雙四氮唑分子式：354.4英文名稱：5,5- two -,- double sulfur phenyl tetrazole：7574分子量： C4H0N8S2

2-氯-6-甲-4-吡甲醛分子式：55.58英文名稱：2- -6- methyl -4-：47963-6-6分子量： C7H6ClNO

-芐分子式：75.27英文名稱：- benzyl piperidine：2905-56-8分子量： C2H7N

芐分子式：22.7英文名稱：Benzyl hydrazine：555-96-4分子量： C7H0N2

4-溴噻唑分子式：64.02英文名稱：4- thiazole bromide：34259-99-9分子量： C3H2BrNS

安格洛苷C英文名稱：Angelo C分子式：784.755分子量：C36H48O9：5909-22-3

4-羥-3-硝吡分子式：40.英文名稱：4- hydroxy -3- nitro pyridine：5435-54-分子量： C5H4N2O3

,3,5-三乙分子式：62.27英文名稱：,3,5- three ethyl benzene：02-25-0分子量： C2H8

2-乙酰胺-5-巰-,3,4-噻二唑分子式：75.23英文名稱：2- acetyl -5- -,3,4- two：32873-56-6分子量： C4H5N3OS2