hFOB 1.19 (人SV40轉染成骨細胞)

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

hFOB 1.19 (人SV40轉染成骨細胞)

商品屬性

商品介紹

別稱 hFOB1.19; hFOB

種屬 人類

年齡（性別） 胎兒

組織來源 骨；成骨細胞；以SV40巨細胞抗原轉染

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 多細胞形態(tài)

參考資料(來源文獻)

生物安全等級 2 [Cells contain SV40 viral sequences]

生長培養(yǎng)基 DMEM/F12＋0.3mg/ml G418＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：34℃

抗原表達情況 SV40 T antigen

基因表達情況 alkaline phosphatase

注意事項 該細胞培養(yǎng)難度較高；培養(yǎng)溫度為度：33.5℃-34℃；培養(yǎng)基中添加G418。

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

（8）根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產品：

大鼠二價金屬離子轉運體(DMT1)檢測試劑盒 ，英文名： DMT1 ELISA Kit

Pig sodium glucose co anspoer 1 (SGLT1) ELISA Kit 豬-葡萄糖共轉運載體1(SGLT1)檢測試劑盒

鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測試劑盒 48T

CLIAKitforM2-PK(MousePyruvateKinase)ELISAKit小鼠同酸激酶M2型同工酶

體液總氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitTNF-α雞腫瘤壞死因子α

IL33重組人 IL33 / Interleukin-33 / NF-HEV 蛋白 Protein

酸性葡糖苷酶α(GαA)重組蛋白 Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)

CCL2重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein

CD8A Protein Human 重組人 CD8A / MAL 蛋白

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

酸性葡糖苷酶α(GαA)重組蛋白 Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)

CD8A Protein Human 重組人 CD8A / MAL 蛋白

IL33重組人 IL33 / Interleukin-33 / NF-HEV 蛋白 Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

CCL2重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein

hFOB 1.19 (人SV40轉染成骨細胞)小鼠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human neuroglobin (NGB) ELISA Kit 人腦紅蛋白(NGB)檢測試劑盒

Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8ELISAKit 人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

GuineapigImmunoglobulinG,IgG檢測試劑盒豚鼠免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性高質敏感比色法定量檢測試劑盒20次

Mousecarcinoembryonicaign,CEAELISAKit小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠血管內皮細胞生長因子受體檢測試劑盒   小鼠血管內皮細胞生長因子受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠血管內皮細胞生長因子受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠血管內皮細胞生長因子受體試劑盒、小鼠血管內皮細胞生長因子受體檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠血管內皮生長因子檢測試劑盒   小鼠血管內皮生長因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠血管內皮生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠血管內皮生長因子試劑盒、小鼠血管內皮生長因子檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠嗜酸粒細胞趨化因子檢測試劑盒   小鼠嗜酸粒細胞趨化因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠嗜酸粒細胞趨化因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠嗜酸粒細胞趨化因子試劑盒、小鼠嗜酸粒細胞趨化因子檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白檢測試劑盒   小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白試劑盒、小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。